伯乐bio-rad转印槽的优点和使用前后的注意事项

　　1小时内转印2块10x7.5cm凝胶；也可以进行低强度的隔夜转印。

　　电极丝相距4cm以产生强电场保证高效的蛋白转印。

　　彩色标记的转印夹和电极确保转印过程中凝胶的正确定向。

　　蓝色致冷芯可*置于bio-rad转印槽内，在快速转印过程中吸收热量。

　　既可作为完整的独立设备，也可作为一个模块与缓冲液槽和盖兼容。

 

　　伯乐bio-rad转印槽使用前后的注意事项：

　　1、转印前准备：在电泳结束前30分钟应开始准备工作在电泳过程中，提前准备转印所需物品：根据转印所用胶的大小，剪一稍比胶大一些的厚滤纸和一刚好大小的厚滤纸，将此两张膜浸入电转印液中；再剪四张大小为5cm×2cm的PVDF膜，左下角剪去一角，将此膜浸泡在甲醇溶液中不超过1min后取出浸入ddH2O中1min，取出浸入转印液中（切滤纸和膜时一定要戴手套，因为手上的蛋白会污染膜）（如果是NC膜，则用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里，要使膜浮于水上，只有下层才与水接触。这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿。若膜沉入水里，膜与水之间形成一层空气膜，这样会阻止膜吸水，靠毛细作用自然吸水后再*浸入水中10min以排除气泡，随后浸泡入转移液中）

 

　　2、转印结束，将膜从电转槽中取出，TBST稍加漂洗3次，每次5-10min；尔后浸没于封闭液中缓慢摇荡1h。封闭是将转印膜上坑坑洼洼的地方用BSA或脱脂奶粉填平，降低抗体的非特异性吸附产生很浓的背景。常用5%BSA和脱脂奶封闭，若是做磷酸化蛋白，只能用BSA，因为，奶中含有磷酸化蛋白。而封闭液浓度，可根据实验需摸索条件。蛋白面朝上，封闭2h，摇床速度不超过40，结束后直接进一抗。